5. aprillil 2013. a kell 14.00 kaitseb Kai Truusalu biomeedikumi auditooriumis 1006 (Ravila 19) filosoofiadoktori kraadi (arstiteadus) taotlemiseks esitatud väitekirja "Probiotic lactobacilli in experimental persistent salmonella infection"
"Probiootiliste laktobatsillide toime eksperimentaalsele persisteerivale salmonella infektsioonile".
Juhendaja: emeriitprofessor Marika Mikelsaar (TÜ mikrobioloogia instituut)
Oponent: professor Eugenia Elefterios Venizelos Bezirtzolou, MD, PhD (Traakia Demokritose Ülikool, Kreeka)
Kokkuvõte:
Salmonella enterica serovar Typhi võib põhjustada persisteeriva infektsiooni ja püsida granuloomidena maksakoes. Kuigi kõhutüüfuse esinemissagedus Eestis on madal, on see ohuks arengumaadesse reisijatele. Kuna S. Typhi tekitab kõhutüüfust ainult inimestel, siis kasutatakse selle uurimiseks eksperimentaalset mudelit, nakatades hiiri Salmonella
Typhimuriumiga ja põhjustades kõhutüüfusele sarnase haiguse. Laktobatsillid kuuluvad inimese soole normaalsesse mikroobikooslusesse. Neid kasutatakse probiootikumidena, mis sobivates annustes mõjuvad tervisele kasulikult.
Probiootiliste laktobatsillide toimemehhanismid on tüvespetsiifilised: otsene antagonistlik mõju patogeenidele seoses vesinikperoksiidi, piimhappe ja/või bakteriotsiinide tekkega, konkurents toitainetele, adhesioon ning immuunsuse modulatsioon. Kuid toimemehhanism persisteerivate infektsioonide puhul pole teada.
Töö eesmärgiks oli selgitada laktobatsillide võimalikku toimet Salmonella persisteeriva infektsiooni korral hiire mudelis mikrobioloogiliste, histoloogiliste, biokeemiliste ja immunoloogiliste uuringutega ja teha kindlaks probiootilise Lactobacillus
plantarum Inducia DSM 21379 mõju soole immuunsüsteemile. Salmonella Typhimuriumi ja laktobatsillide mikrobioloogilisteks uuringuteks tehti külvid verest, maksast, põrnast, peen- ja jämesoolest. Samade kudede morfoloogia määramiseks värviti koelõigud hematoksüliin eosiiniga. Oksüdatiivse stressi markerid: LPO, GSSG/GSH ja
raua hulk ning tsütokiinide INF-γ, TNF-α ja IL-10 konsentratsiooni mõõdeti soole limaskestast ja maksast.
Tulemused näitasid, et:
1. Persisteeriva S.Typhimurium infektsiooni korral leiti S. Typhimurium verest ja uuritud
organitest; granuloomid maksast ja põrnast, kõrgenenud olid oksüdatiivse stressi näitajad ning
proinflammatoorsed tsütokiinid INF-γ ja TNF-α sooles ja maksas.
2. Kahe in vitro kõrgete antimikroobsete ja antioksüdantsete omadustega inimpäritolu laktobatsilli
tüve L. fermentum ME-3 ja L. acidophilus E-1 koosmanustamine 10 päeva jooksul ei eemaldanud
S.Typhimuriumi, kuid vähendas oksüdatiivse stressi näitajaid kudedes.
3. Probiootilist bakterit L. plantarum Induciat sisaldava juustu manustamine hiirtele ühe kuu jooksul
põhjustas laktobatsillide üldhulga tõusu ning peen- ja jämesoole lümfifolliikulite hüperplaasia.
4. Kombineeritud ravi ofloksatsiini ja L. fermentum ME-3-ga vähendas hiirtel S. Typhimuriumi
hulka ja granuloomide teket maksas, samuti oksüdatiivse stressi näitajaid ja vähendas 10 päeva pärast nakatamist INF-γ hulka maksas ja sooles ning suurendas põletikuvastase tsütokiini IL-10 hulka maksas. Maksa granuloomide puudumine oli seotud kõrge laktobatsillide hulgaga sooles.Seega soodustab probiootikum L. fermentum ME-3 persisteeriva Salmonella sp. infektsiooni antimikroobse ravi korral oluliselt haigustekitaja eemaldamist oma antagonistliku aktiivsuse,
antioksüdantse ja immuunmoduleeriva toime kaudu.